फार्मेसी और फार्मास्युटिकल रिसर्च जर्नल खुला एक्सेस

अमूर्त

रक्त कैंसर के उपचार के लिए बेहतर बायोफार्मास्युटिकल प्रस्तुत करने के लिए नए एल-एस्पेरेजिनेज की बायोप्रॉस्पेक्टिंग और तर्कसंगत इंजीनियरिंग

टेल्स ए कोस्टा-सिल्वा, आईएम कोस्टा, जीएस अगामेज़-मोंटाल्वो, ए पेसोआ और जी मोंटेइरो

परिचय : बैक्टीरिया द्वारा उत्पादित एल-एस्पेरेजिनेज (EC3.5.1.1) का उपयोग तीव्र लिम्फोसाइटिक ल्यूकेमिया (ALL) के उपचार में किया जाता है। हालाँकि, ALL उपचार के दौरान बैक्टीरियल L-ASNase के उपयोग से असंख्य दुष्प्रभाव दर्ज किए गए। प्रोकैरियोटिक L-एस्पेरेजिनेज उपचार से जुड़ी अन्य कमियाँ अतिसंवेदनशीलता प्रतिक्रियाएँ, कम तापीय स्थिरता, मानव प्रोटीज़ का क्षरण और तेज़ निकासी हैं।

उद्देश्य : इन कमियों को दूर करने के लिए कुछ तकनीकों का इस्तेमाल किया गया है जैसे कि बायो प्रॉस्पेक्टिंग यूकेरियोटिक स्रोत या साइट-निर्देशित उत्परिवर्तन द्वारा वाणिज्यिक जीवाणु एल-एस्पैरैगिनेज का संशोधन। एल-एएसएनएज के यूकेरियोटिक स्रोतों को खोजने के लिए, इस अध्ययन में 20 फिलामेंटस कवक का इस्तेमाल किया गया, जिन्हें जेलीफ़िश ओलिंडियास सैम्बाक्विएंसिस के माइक्रोबायोम से अलग किया गया था।

परिणाम : जेलीफ़िश टेंटेकल्स (जेलीफ़िश में भूरे रंग की संरचनाएँ जो विष उत्पादन के लिए ज़िम्मेदार होती हैं) से अलग किए गए छह कवक नमूनों ने जलमग्न किण्वन प्रक्रिया द्वारा एल-एस्पेरेजिनेज़ उत्पादन दिखाया। सबसे ज़्यादा सक्रियता स्ट्रेन OS02 द्वारा 2.7 U/g के साथ दिखाई गई। इस स्ट्रेन को प्रतिक्रिया सतह पद्धति के केंद्रीय समग्र डिज़ाइन द्वारा एल-एस्पेरेजिनेज़ उत्पादन के अनुकूलन के लिए चुना गया था। अधिकतम एंजाइम उत्पादन (11.45 U/g) के लिए, सबसे अच्छी स्थिति संशोधित Czapek Dox माध्यम थी जिसमें L-एस्पेरेजिन की पूर्ति की गई थी और 32.5 � C और 190 rpm पर pH 7.4 पर समायोजित किया गया था।

निष्कर्ष : वाणिज्यिक जीवाणु एल-एस्पेरेजिनेज की प्रोटीन इंजीनियरिंग के संबंध में हमने एल-एस्पेरेजिनेज प्रोटीज-प्रतिरोध प्राप्त करने के लिए साइट-निर्देशित उत्परिवर्तन का उपयोग किया: एक नया एस्चेरिचिया कोली एल-एस्पेरेजिनेज (ईसीएआईआई) संस्करण, ट्रिपल म्यूटेंट। प्रारंभिक परिणामों से पता चला कि उत्परिवर्ती एंजाइम ई. कोली बीएल21 (डीई3) में व्यक्त किया गया था और मूल एल-एस्पेरेजिनेज गतिविधि को संरक्षित किया गया था। ये एल-एस्पेरेजिनेज प्रोटियो फॉर्म वैकल्पिक बायोफार्मास्यूटिकल्स हो सकते हैं जिनमें ALL उपचार में परिणाम को और बेहतर बनाने की क्षमता है।